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Anticorpos monoclonais – hibridomas, ELISA e teste de HIV

BiologiaSaúde e doençaIdades 15–16Laboratório virtual

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Um laboratório virtual passo a passo: imunize um camundongo, colete linfócitos B, funda-os com células de mieloma usando PEG, selecione hibridomas em meio HAT, faça a triagem de uma placa de 96 poços e clone a célula que produz o anticorpo desejado. Os usos incluem uma tira de teste de gravidez com hCG e um conjugado anticorpo-fármaco que atinge células cancerosas. Faça um ELISA indireto ou sanduíche com lavagens e controles e leia a absorbância; depois veja o HIV se replicar nos linfócitos T auxiliares e por que os testes de anticorpos têm uma janela imunológica.

Aula: Anticorpos monoclonais: técnica do hibridoma, usos no diagnóstico e no tratamento, ELISA

O que mostra

Este laboratório virtual mostra como os anticorpos monoclonais são produzidos e usados. Um camundongo é imunizado, seus linfócitos B são fundidos com células de mieloma e só os hibridomas sobrevivem em meio HAT; a diluição limitante e o ELISA encontram o clone que produz o anticorpo desejado. Escolhas erradas dão resultados errados. A tela Usos mostra uma tira de hCG e um conjugado anticorpo-fármaco. No ELISA, pular uma lavagem dá falsos positivos, e os controles e um ponto de corte decidem a validade. O modelo do HIV usa valores típicos sem tratamento; o número de células é reduzido.

Como usar

Em Produzir anticorpos monoclonais, escolha o Anticorpo desejado, pressione os botões de cada etapa em ordem, toque um poço positivo e pressione Clonar o poço escolhido. Em Usos, ajuste hCG na urina, pressione Mergulhar a tira e depois Ler o resultado, ou escolha um fármaco e pressione Injetar. No ELISA, pressione os reagentes e Lavar os poços na ordem que você quiser e depois Parar e ler A₄₅₀. Em HIV e testes, arraste Tempo desde a infecção e pressione Fazer o ELISA agora.

Parâmetros que você pode mudar

  • Tela Produzir anticorpos monoclonais, Usos: teste de gravidez, fármaco-alvo, ELISA em placa de 96 poços, HIV e testes
  • Anticorpo desejado Anti-hCG (teste de gravidez), Anti-HER2 (tratamento do câncer de mama)
  • Uso Tira de teste de gravidez (hCG), Fármaco-alvo contra o câncer
  • Concentração de hCG na urina 0–500 mIU/mL
  • Tipo de ELISA Indireto (detecta anticorpos anti-HIV), Sanduíche (detecta hCG)
  • Tempo de incubação do substrato 1–30 min
  • Tempo desde a infecção pelo HIV 0–624 semana
  • Tratamento do HIV Sem tratamento, Terapia antirretroviral a partir do mês 6, Terapia antirretroviral a partir do ano 7

Perguntas para explorar

  1. Por que só os hibridomas sobrevivem em meio HAT, e o que aconteceria na placa sem PEG?
  2. Se você pular a lavagem após o anticorpo ligado à enzima, o que mostra o controle negativo e por quê?
  3. Por que uma pessoa infectada pelo HIV há poucas semanas ainda pode ter um ELISA de anticorpos negativo?

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