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Anticorps monoclonaux – hybridomes, ELISA et dépistage du VIH

BiologieSanté et maladies15–16 ansLaboratoire virtuel

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Un laboratoire virtuel étape par étape : immunisez une souris, prélevez des lymphocytes B, fusionnez-les avec des cellules de myélome grâce au PEG, sélectionnez les hybridomes en milieu HAT, criblez une plaque de 96 puits et clonez la cellule qui produit l’anticorps voulu. Parmi les applications : une bandelette de test de grossesse à hCG et un conjugué anticorps-médicament qui cible les cellules cancéreuses. Réalisez un ELISA indirect ou sandwich avec lavages et témoins et lisez l’absorbance, puis voyez le VIH se répliquer dans les lymphocytes T auxiliaires et pourquoi les tests d’anticorps ont une fenêtre sérologique.

Leçon : Anticorps monoclonaux : technique des hybridomes, usages en diagnostic et en traitement, ELISA

Ce qu’elle montre

Ce laboratoire virtuel suit la fabrication et l’utilisation des anticorps monoclonaux. Une souris est immunisée, ses lymphocytes B sont fusionnés avec des cellules de myélome et seuls les hybridomes survivent en milieu HAT ; la dilution limite et l’ELISA trouvent le clone qui produit l’anticorps voulu. Les mauvais choix donnent de mauvais résultats. L’écran Applications montre une bandelette à hCG et un conjugué anticorps-médicament. Dans l’ELISA, sauter un lavage donne des faux positifs, et les témoins et un seuil décident de la validité. Le modèle du VIH utilise des valeurs typiques sans traitement ; le nombre de cellules est réduit.

Mode d’emploi

Dans Fabriquer des anticorps monoclonaux, choisissez l’Anticorps voulu, appuyez sur les boutons des étapes dans l’ordre, touchez un puits positif puis Cloner le puits choisi. Dans Applications, réglez hCG dans l’urine, appuyez sur Tremper la bandelette puis Lire le résultat, ou choisissez un médicament et appuyez sur Injecter. Dans ELISA, appuyez sur les réactifs et Laver les puits dans l’ordre de votre choix, puis Arrêter et lire A₄₅₀. Dans VIH et dépistage, faites glisser Temps depuis l’infection et appuyez sur Faire l’ELISA maintenant.

Paramètres modifiables

  • Écran Fabriquer des anticorps monoclonaux, Applications : test de grossesse, médicament ciblé, ELISA sur plaque de 96 puits, VIH et dépistage
  • Anticorps voulu Anti-hCG (test de grossesse), Anti-HER2 (traitement du cancer du sein)
  • Application Bandelette de test de grossesse (hCG), Médicament ciblé contre le cancer
  • Concentration de hCG dans l’urine 0–500 mIU/mL
  • Type d’ELISA Indirect (détecte les anticorps anti-VIH), Sandwich (détecte la hCG)
  • Durée d’incubation du substrat 1–30 min
  • Temps depuis l’infection par le VIH 0–624 semaine
  • Traitement du VIH Sans traitement, Traitement antirétroviral dès le 6e mois, Traitement antirétroviral dès la 7e année

Questions à explorer

  1. Pourquoi seuls les hybridomes survivent-ils en milieu HAT, et que se passerait-il sur la plaque sans PEG ?
  2. Si vous sautez le lavage après l’anticorps couplé à l’enzyme, que montre le témoin négatif, et pourquoi ?
  3. Pourquoi une personne infectée par le VIH depuis quelques semaines peut-elle avoir un ELISA d’anticorps négatif ?

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