Laboratório virtual de halos de inibição: antissépticos

Atualizado em 2026-10-07

Este laboratório virtual de halos de inibição segue a prática obrigatória do AQA GCSE Biology sobre antissépticos e antibióticos. Os alunos preparam uma placa de ágar com técnica asséptica, colocam discos embebidos em clorexidina em quatro concentrações e incubam três placas. Eles medem cada halo transparente com uma régua na tela, calculam a área dele com πr² e comparam as médias. Pular uma etapa de propósito faz crescer colônias contaminantes. Todos os números abaixo foram lidos na simulação.

Halos de inibição – antissépticos e antibióticos sobre bactérias

Alinhamento com o currículo

AQA GCSE Biology: especificação 4.1.1.6 (cultivo de microrganismos, só Biology) e a prática obrigatória sobre como antissépticos ou antibióticos afetam o crescimento bacteriano, medido pelos halos transparentes. Ela inclui a habilidade matemática de calcular uma área transparente com πr².
AP Biology: a mesma técnica asséptica vem antes da investigação de transformação bacteriana. Veja o laboratório virtual de biotecnologia.
O Simulic não é afiliado ao College Board nem à AQA, nem endossado por eles.

Antes do laboratório (5 min)

Pergunte: "Quatro discos têm clorexidina a 0,2 %, 0,1 %, 0,05 % e 0,02 %. Como o halo transparente vai mudar à medida que a concentração cai?" Os alunos escolhem uma resposta e dão um motivo. Num link de turma, esta é a pergunta 1; a simulação é liberada depois que eles respondem.

Método na simulação

Nos valores iniciais abaixo da simulação, escolha Bacillus subtilis, Clorexidina em 4 concentrações, 25 °C e 48 h. Deixe a variação aleatória em 5 %. O disco E é embebido em água estéril: é o controle.
Placa 1: clique no botão azul de técnica em cada uma das oito etapas, de "Na chama, esfriar" até "Inverter, incubar a 25 °C". Leia o motivo mostrado abaixo de cada etapa.
Depois da incubação, ajuste Ampliar em Disco A. Arraste a régua para que a borda dela passe pelo centro do disco, ponha o 0 numa borda do halo e leia a outra borda. Registre o diâmetro incluindo o disco de 6 mm. Se não houver halo, registre 6.
Meça os discos B a E do mesmo jeito, digite os diâmetros na tabela de resultados e clique em Verificar medidas. Leituras com diferença de até 1 mm são marcadas como corretas.
Clique em Nova placa (repetir) e depois em Rápido, todas as etapas certas. Meça a placa 2 e depois faça o mesmo com a placa 3.
Leia na tabela o diâmetro médio d̄ e a área A de cada disco. Use Calcular para para ver as etapas de πr².
Teste de contaminação: clique em Recomeçar. Clique em "Na chama, esfriar", depois em Pular em "Trabalhe perto da chama do bico de Bunsen" e depois em Rápido. Conte as colônias que parecem diferentes do tapete.

Disco	Clorexidina (%)	Placa 1 d (mm)	Placa 2 d (mm)	Placa 3 d (mm)	Média d̄ (mm)	Área πr² (mm²)
A	0,2
B	0,1
C	0,05
D	0,02
E	0 (água estéril)

Resultados esperados

Sem variação aleatória, os halos medem 20,3 mm (A), 18,6 mm (B), 16,7 mm (C) e 13,8 mm (D). O disco E sempre dá 6 mm: sem halo. Com 5 % de variação, cada placa difere um pouco. Nas nossas placas de teste, o disco A mediu 20,7, 20,8, 21,3 e 21,5 mm. Uma média de três placas quase sempre fica entre 18,5 e 22 mm.

As áreas médias são cerca de 320, 270, 220 e 150 mm². Cada vez que a concentração dobra, a área cresce mais ou menos o mesmo tanto, cerca de 50 mm². Ela não dobra: passar de 0,1 % para 0,2 % multiplica a área por só cerca de 1,2. O agente se difunde para fora, então a concentração dele cai bruscamente com a distância ao disco.

Quando "Trabalhe perto da chama do bico de Bunsen" foi pulada, a placa teve 2 ou 3 colônias contaminantes (bolor felpudo, amarelas ou rosa), e a nota abaixo da placa disse que ela estava contaminada. Os halos em si não mudaram.

Perguntas para os alunos

Previsão: como o halo transparente vai mudar à medida que a concentração de clorexidina cai de 0,2 % para 0,02 %?
Qual é uma variável controlada nesta investigação?
Disco A (0,2 %), três placas: qual é o diâmetro médio do halo dele?
De 0,1 % para 0,2 %, a concentração dobra. O que acontece com a área média do halo?
Pule "Trabalhe perto da chama do bico de Bunsen" numa nova placa. Descreva o que cresce e explique por que essa etapa importa.

Respostas para o professor:

Os halos ficam menores.
A temperatura e o tempo de incubação (também as bactérias, o tamanho do disco e o volume de cultura).
Cerca de 20 mm; aceita-se qualquer média de 17,5 a 23 mm.
Ela aumenta, mas só cerca de 1,2 vez, não o dobro.
Colônias contaminantes (bolor, amarelas ou rosa) crescem no meio do tapete. O ar quente que sobe da chama leva esporos e poeira para longe da placa aberta. Sem isso, micróbios do ar caem no ágar, competem com o tapete, podem ser patogênicos e tornam os resultados pouco confiáveis.

Erros conceituais comuns

"Um halo maior quer dizer que as bactérias são maiores." O halo mostra onde o agente impediu o crescimento. Um halo maior quer dizer um agente mais eficaz naquela concentração.
"O dobro da concentração, o dobro do halo." A área sobe mais ou menos o mesmo tanto a cada vez que a concentração dobra.
"O etanol é fraco porque o halo dele é pequeno." O etanol evapora do disco e o óleo de melaleuca se difunde mal no ágar. Os dois matam bem as bactérias por contato.
"37 °C é melhor porque as bactérias crescem mais rápido." Na escola nunca se passa de 25 °C, porque os patógenos humanos crescem melhor na temperatura do corpo. Na simulação, os halos também ficam um pouco menores a 37 °C.

Extensão

Bactérias gram-negativas. Escolha E. coli K-12 e o conjunto Antibióticos e antissépticos. A penicilina dá cerca de 30 mm com B. subtilis, mas nenhum halo com E. coli. Pergunte aos alunos por quê.
Comparar antissépticos. Use o conjunto Quatro antissépticos e ordene-os pela área média.

Perguntas frequentes

Isso substitui a prática obrigatória?

Não. As práticas obrigatórias da AQA ainda precisam ser feitas à mão. Use a simulação para planejar e treinar a técnica asséptica, ou para discutir os resultados. Veja laboratórios virtuais vs. laboratórios reais.

Por que os meus halos são diferentes dos do meu colega?

Cada placa tem um pouco de variação aleatória, como as placas reais. É por isso que o método usa três placas e uma média. Para dar placas idênticas a todos, ajuste a variação aleatória em 0 % nos valores iniciais do link da turma.

Posso fixar as configurações para a minha turma?

Sim. Na página Compartilhar, crie um link e defina as bactérias, o conjunto de discos, a temperatura, o tempo de incubação e a variação nos valores iniciais.