Halos de inibição – antissépticos e antibióticos sobre bactérias
BiologiaMicrobiologia e vírusIdades 15–16
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Entre para usarEnsaio de difusão em disco numa placa de ágar: execute ou pule cada etapa da técnica asséptica (uma etapa pulada deixa crescer colônias contaminantes), coloque discos de antibióticos, antissépticos e um controle de água estéril, incube em time-lapse e meça o diâmetro dos halos com uma régua na tela. Calcule a área πr² passo a passo, repita em três placas e compare as médias.
Aula: Prática obrigatória: efeito de antissépticos e antibióticos no crescimento bacteriano
O que mostra
Discos de papel embebidos em antibióticos ou antissépticos são colocados sobre um tapete de bactérias crescendo em ágar. Cada substância se difunde para fora e impede o crescimento onde sua concentração é suficiente, deixando um halo de inibição transparente; um halo maior indica um agente mais eficaz naquela concentração. A placa virtual também modela a técnica asséptica: cada etapa que você pula deixa crescer colônias contaminantes de outras cores e formas. O tamanho dos halos segue um modelo de difusão com pequena variação aleatória, por isso placas repetidas e médias importam. Nenhuma bactéria é cultivada, e as regras de segurança da prática real são apresentadas.
Como usar
Escolha as bactérias, a temperatura e o tempo de incubação, e um agente e uma concentração para os discos A–D; o disco E é o controle de água estéril. Avance pelas etapas clicando num botão de técnica ou em Pular, ou clique em Rápido, todas as etapas certas. Após a incubação, use Ampliar e arraste a régua para medir cada halo, anote o diâmetro na tabela e clique em Verificar medidas. Adicione até três placas com Nova placa (repetir) e compare as áreas médias.
Parâmetros que você pode mudar
- Bactérias cultivadas Bacillus subtilis (gram-positiva), E. coli K-12 (gram-negativa)
- Conjunto inicial de discos Antibióticos e antissépticos, Três antibióticos, Quatro antissépticos, Clorexidina em 4 concentrações
- Temperatura de incubação 25 °C (máximo na escola), 37 °C (não usado na escola)
- Tempo de incubação 24–72 h
- Variação aleatória entre placas 0–15 %
Perguntas para explorar
- Por que o experimento precisa de um disco de papel embebido em água estéril?
- Dobrar a concentração de clorexidina dobra a área do halo transparente?
- Por que a penicilina forma um halo grande com Bacillus subtilis, mas quase nenhum com E. coli?