TP d’écrasement d’apex racinaire – phases de la mitose et indice mitotique

BiologieBiologie cellulaire15–16 ans

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Un TP virtuel : hydrolysez des apex de racines d’oignon dans l’acide chlorhydrique, colorez-les et écrasez-les, puis observez les cellules à ×400. Touchez chaque cellule pour la classer en interphase, prophase, métaphase, anaphase ou télophase, comptez plusieurs champs pour obtenir l’indice mitotique et le pourcentage de cellules dans chaque phase, et estimez la durée de chaque phase. Comparez des racines témoins à des racines traitées à la lectine ou à la colchicine, et des zones à différentes distances de l’apex, avec un test du khi-deux, puis comptez des asques de Sordaria pour trouver une fréquence de crossing-over et une distance gène–centromère.

Leçon : Mitose – écrasement d’apex racinaire et indice mitotique

Ce qu’elle montre

Les cellules se divisent par mitose surtout dans le méristème, juste derrière la coiffe. Lors d’un écrasement d’apex racinaire, l’acide chlorhydrique chaud dégrade la lamelle moyenne pour séparer les cellules, et un colorant de l’ADN rend les chromosomes visibles. Comme les cellules ne se divisent pas en même temps, la part des cellules dans chaque phase reflète la durée de cette phase. L’indice mitotique, cellules en mitose divisées par le total, compare la vitesse de division des tissus ; un test du khi-deux indique si un traitement le modifie vraiment. Les asques de Sordaria montrent le crossing-over entre un gène et son centromère.

Mode d’emploi

Dans Préparer la lame, choisissez Hydrolyse HCl et Colorant, puis utilisez Étape suivante ou Lire les étapes. Dans Microscope, choisissez une phase, touchez des cellules entières, appuyez sur Vérifier puis sur Champ suivant ; appuyez sur Enregistrer l’échantillon au-delà de 200 cellules. Dans Comparer, appuyez sur Compter 300 cellules pour chaque traitement et zone, puis choisissez Échantillon A et Échantillon B. Dans Sordaria, classez les asques mûrs.

Paramètres modifiables

  • Écran Préparer la lame, Microscope : compter les cellules, Comparer les échantillons, Sordaria : crossing-over
  • Traitement de la racine Témoin (eau), Lectine, Colchicine
  • Zone de la racine prélevée 0–2 mm de l’apex, 2–5 mm de l’apex, 5–10 mm de l’apex
  • Durée d’hydrolyse dans HCl 1 M à 60 °C 0 min (omise), 5 min, 20 min
  • Colorant Bleu de toluidine, Orcéine acétique, Sans colorant
  • Durée du cycle cellulaire 8–40 h
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Questions à explorer

  1. Pourquoi l’indice mitotique est-il bien plus élevé à 0–2 mm de l’apex qu’à 5–10 mm ?
  2. Pourquoi les cellules en prophase sont-elles souvent plus nombreuses qu’en anaphase, et comment en déduire la durée des phases ?
  3. Pourquoi la colchicine augmente-t-elle l’indice mitotique alors qu’elle empêche les cellules de terminer la mitose ?