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Hemmhöfe – Antiseptika und Antibiotika gegen Bakterien

BiologieMikrobiologie und VirenAlter 15–16

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Agardiffusionstest mit Plättchen: Führen Sie jeden Schritt der sterilen Arbeitstechnik aus oder lassen Sie ihn aus (ein ausgelassener Schritt lässt Fremdkolonien wachsen), legen Sie Plättchen mit Antibiotika, Antiseptika und eine Kontrolle mit sterilem Wasser auf, bebrüten Sie im Zeitraffer und messen Sie die Hemmhöfe mit einem Lineal auf dem Bildschirm. Berechnen Sie die Fläche πr² Schritt für Schritt, wiederholen Sie auf drei Platten und vergleichen Sie die Mittelwerte.

Lektion: Pflichtpraktikum: Wirkung von Antiseptika und Antibiotika auf das Bakterienwachstum

Was sie zeigt

Papierplättchen, getränkt mit Antibiotika oder Antiseptika, werden auf einen Bakterienrasen auf Agar gelegt. Jeder Stoff diffundiert nach außen und stoppt das Wachstum dort, wo seine Konzentration hoch genug ist; so entsteht ein klarer Hemmhof. Ein größerer Hemmhof bedeutet einen wirksameren Stoff bei dieser Konzentration. Die virtuelle Platte bildet auch die sterile Arbeitstechnik ab: Jeder ausgelassene Schritt lässt Fremdkolonien mit anderen Farben und Formen wachsen. Die Größe der Hemmhöfe folgt einem Diffusionsmodell mit kleiner Zufallsstreuung, daher zählen Wiederholungen und Mittelwerte. Es werden keine Bakterien kultiviert, und die Sicherheitsregeln für das echte Praktikum sind aufgeführt.

So funktioniert es

Wählen Sie die Bakterien, die Bebrütungstemperatur und -dauer sowie Stoff und Konzentration für die Plättchen A–D; Plättchen E ist die Kontrolle mit sterilem Wasser. Gehen Sie die Schritte durch, indem Sie eine Technik oder Auslassen wählen, oder klicken Sie auf Schnell, alle Schritte richtig. Nach der Bebrütung nutzen Sie Zoom und ziehen das Lineal, um jeden Hemmhof zu messen, tragen den Durchmesser in die Tabelle ein und klicken auf Messwerte prüfen. Mit Neue Platte (Wiederholung) kommen bis zu drei Platten hinzu.

Einstellbare Parameter

  • Kultivierte Bakterien Bacillus subtilis (grampositiv), E. coli K-12 (gramnegativ)
  • Anfangssatz der Plättchen Antibiotika und Antiseptika, Drei Antibiotika, Vier Antiseptika, Chlorhexidin in 4 Konzentrationen
  • Bebrütungstemperatur 25 °C (Schulmaximum), 37 °C (nicht in der Schule)
  • Bebrütungsdauer 24–72 h
  • Zufallsstreuung zwischen Platten 0–15 %

Fragen zum Erkunden

  1. Warum braucht der Versuch ein Plättchen, das mit sterilem Wasser getränkt ist?
  2. Verdoppelt sich die Fläche des Hemmhofs, wenn man die Chlorhexidin-Konzentration verdoppelt?
  3. Warum bildet Penicillin bei Bacillus subtilis einen großen Hemmhof, bei E. coli aber kaum einen?

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