Zones d'inhibition – antiseptiques et antibiotiques sur des bactéries

BiologieMicrobiologie et virus15–16 ans

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Antibiogramme par diffusion en milieu gélosé : réalisez ou sautez chaque étape de la technique aseptique (une étape sautée laisse pousser des colonies contaminantes), déposez des disques d'antibiotiques, d'antiseptiques et un témoin à l'eau stérile, incubez en accéléré puis mesurez le diamètre des zones avec une règle à l'écran. Calculez l'aire πr² étape par étape, répétez sur trois boîtes et comparez les moyennes.

Leçon : Travaux pratiques : effet des antiseptiques et des antibiotiques sur la croissance bactérienne

Ce qu’elle montre

Des disques de papier imbibés d'antibiotiques ou d'antiseptiques sont déposés sur une nappe bactérienne sur gélose. Chaque substance diffuse vers l'extérieur et bloque la croissance là où sa concentration est suffisante, ce qui laisse une zone d'inhibition claire ; plus la zone est grande, plus l'agent est efficace à cette concentration. La boîte virtuelle modélise aussi la technique aseptique : chaque étape que vous sautez laisse pousser des colonies contaminantes d'autres couleurs et formes. La taille des zones suit un modèle de diffusion avec une petite variation aléatoire, d'où l'intérêt des répétitions et des moyennes. Aucune bactérie n'est cultivée ; les règles de sécurité du TP réel sont rappelées.

Mode d’emploi

Choisissez les bactéries, la température et la durée d'incubation, puis un agent et une concentration pour les disques A–D ; le disque E est le témoin à l'eau stérile. Suivez les étapes en cliquant sur un bouton de technique ou sur Sauter, ou cliquez sur Rapide, toutes étapes correctes. Après l'incubation, utilisez Zoom et faites glisser la règle pour mesurer chaque zone, notez le diamètre dans le tableau et cliquez sur Vérifier les mesures. Ajoutez jusqu'à trois boîtes avec Nouvelle boîte (répéter) et comparez les aires moyennes.

Paramètres modifiables

  • Bactéries cultivées Bacillus subtilis (Gram positif), E. coli K-12 (Gram négatif)
  • Jeu de disques de départ Antibiotiques et antiseptiques, Trois antibiotiques, Quatre antiseptiques, Chlorhexidine à 4 concentrations
  • Température d'incubation 25 °C (maximum à l'école), 37 °C (interdit à l'école)
  • Durée d'incubation 24–72 h
  • Variation aléatoire entre boîtes 0–15 %

Questions à explorer

  1. Pourquoi l'expérience a-t-elle besoin d'un disque imbibé d'eau stérile ?
  2. Doubler la concentration de chlorhexidine double-t-il l'aire de la zone claire ?
  3. Pourquoi la pénicilline donne-t-elle une grande zone avec Bacillus subtilis mais presque aucune avec E. coli ?

Idées pour la classe

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