Halos de inhibición – antisépticos y antibióticos sobre bacterias

BiologíaMicrobiología y virusEdades 15–16

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Ensayo de difusión en disco sobre una placa de agar: realiza u omite cada paso de la técnica aséptica (un paso omitido deja crecer colonias contaminantes), coloca discos de antibióticos, antisépticos y un control de agua estéril, incuba en cámara rápida y mide el diámetro de los halos con una regla en pantalla. Calcula el área πr² paso a paso, repite en tres placas y compara las medias.

Lección: Práctica obligatoria: efecto de los antisépticos y antibióticos sobre el crecimiento bacteriano

Qué muestra

Se colocan discos de papel empapados en antibióticos o antisépticos sobre un césped bacteriano en agar. Cada sustancia se difunde hacia fuera y detiene el crecimiento donde su concentración es suficiente, dejando un halo de inhibición transparente; un halo mayor indica un agente más eficaz a esa concentración. La placa virtual también modela la técnica aséptica: cada paso que omitas deja crecer colonias contaminantes de otros colores y formas. El tamaño de los halos sigue un modelo de difusión con una pequeña variación aleatoria, por eso importan las repeticiones y las medias. No se cultivan bacterias y se indican las normas de seguridad de la práctica real.

Cómo usarla

Elige las bacterias, la temperatura y el tiempo de incubación, y un agente y una concentración para los discos A–D; el disco E es el control de agua estéril. Avanza por los pasos pulsando un botón de técnica u Omitir, o pulsa Rápido, todos los pasos bien. Tras la incubación, usa Ampliar y arrastra la regla para medir cada halo, anota el diámetro en la tabla y pulsa Comprobar medidas. Añade hasta tres placas con Nueva placa (repetir) y compara las áreas medias.

Parámetros que puedes cambiar

  • Bacterias cultivadas Bacillus subtilis (grampositiva), E. coli K-12 (gramnegativa)
  • Conjunto inicial de discos Antibióticos y antisépticos, Tres antibióticos, Cuatro antisépticos, Clorhexidina a 4 concentraciones
  • Temperatura de incubación 25 °C (máximo escolar), 37 °C (no se usa en la escuela)
  • Tiempo de incubación 24–72 h
  • Variación aleatoria entre placas 0–15 %

Preguntas para explorar

  1. ¿Por qué el experimento necesita un disco de papel empapado en agua estéril?
  2. ¿Duplicar la concentración de clorhexidina duplica el área del halo transparente?
  3. ¿Por qué la penicilina da un halo grande con Bacillus subtilis pero casi ninguno con E. coli?