Prática da reação de Hill – DCPIP e cloroplastos isolados
BiologiaFisiologia vegetalIdades 16–17Laboratório virtual
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Triture folhas em meio de isolamento frio, filtre e centrifugue para obter cloroplastos, adicione DCPIP azul e meça a absorbância enquanto ele perde a cor. Faça controles no escuro e sem cloroplastos, e trace a taxa em função da distância da lâmpada ou da temperatura.
Aula: Reações dependentes de luz: reação de Hill, DCPIP como aceptor de elétrons, isolamento de cloroplastos, efeito da intensidade luminosa e da temperatura
O que mostra
Em 1938, Robin Hill mostrou que cloroplastos isolados, na luz, podem reduzir um corante adicionado. Uma desidrogenase do cloroplasto normalmente passa os elétrons das reações dependentes de luz ao NADP; aqui quem os recebe é o DCPIP, azul quando oxidado e incolor quando reduzido. Você prepara um extrato de cloroplastos, usa cinco tubos para ver do que a mudança de cor depende e mede a taxa em várias distâncias da lâmpada e temperaturas. Os tubos e o plano de leituras seguem a prática escolar; as taxas, os filtros e o efeito de cada preparo são estimativas que dão o resultado usual.
Como usar
Em Extrato, escolha Meio, Mantido e Centrífuga, e pressione Próximo passo ou Todos os passos. Em Cinco tubos, ajuste Distância da lâmpada e pressione Iniciar: as leituras a cada 2 minutos preenchem a tabela. Em Taxa, pressione Medir para um tubo, ou Série de distâncias ou Série de temperaturas, e escolha o eixo x em Taxa em função de.
Parâmetros que você pode mudar
- Experimento Extrato, Cinco tubos, Taxa
- Meio de trituração Meio de isolamento, Água destilada
- Mantido No gelo, Na bancada
- Centrífuga Alta rotação, Baixa rotação
- Distância da lâmpada 10–100 cm
- Temperatura 5–60 °C
- Béquer de água como barreira de calor
- Filtro do colorímetro Vermelho, Verde, Azul
- Taxa em função de Distância, Intensidade luminosa, Temperatura
Perguntas para explorar
- Quais tubos continuam azuis, e o que cada um mostra sobre o que a reação precisa?
- Quando a intensidade luminosa quadruplica, de 60 cm para 30 cm, a taxa também quadruplica? Por quê?
- Como as taxas a 15 cm e a 100 cm respondem à temperatura, e qual fator limita cada uma?