Práctica de la reacción de Hill – DCPIP y cloroplastos aislados

Qué muestra

En 1938 Robin Hill mostró que los cloroplastos aislados, con luz, pueden reducir un colorante añadido. Una deshidrogenasa del cloroplasto suele pasar los electrones de las reacciones dependientes de la luz al NADP; aquí los acepta el DCPIP, azul cuando está oxidado e incoloro cuando está reducido. Preparas un extracto de cloroplastos, usas cinco tubos para ver de qué depende el cambio de color y mides la velocidad con varias distancias de la lámpara y temperaturas. Los tubos y el plan de lecturas siguen la práctica escolar; las velocidades, los filtros y el efecto de cada preparación son estimaciones que dan el resultado habitual.

Cómo usarla

En Extracto, elige Medio, Se guarda y Centrífuga, y pulsa Paso siguiente o Todos los pasos. En Cinco tubos, ajusta Distancia de la lámpara y pulsa Empezar: las lecturas cada 2 minutos llenan la tabla. En Velocidad, pulsa Medir para un tubo, o Serie de distancias o Serie de temperaturas, y elige el eje x en Velocidad frente a.

Parámetros que puedes cambiar

• Experimento Extracto, Cinco tubos, Velocidad
• Medio de triturado Medio de aislamiento, Agua destilada
• Se guarda En hielo, En la mesa
• Centrífuga Alta velocidad, Baja velocidad
• Distancia de la lámpara 10–100 cm
• Temperatura 5–60 °C
• Vaso de agua como pantalla térmica
• Filtro del colorímetro Rojo, Verde, Azul
• Velocidad frente a Distancia, Intensidad luminosa, Temperatura

Preguntas para explorar

1. ¿Qué tubos siguen azules, y qué indica cada uno sobre lo que necesita la reacción?
2. Si la intensidad luminosa se multiplica por cuatro, de 60 cm a 30 cm, ¿se multiplica por cuatro la velocidad? ¿Por qué?
3. ¿Cómo responden a la temperatura las velocidades a 15 cm y a 100 cm, y qué factor limita cada una?