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TP d'extraction de l'ADN – fraise, banane, oignon ou cellules de la joue

BiologieBiotechnologies17–18 ansLaboratoire virtuel

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Extraction virtuelle de l'ADN : écrasez un tissu de fraise, de banane ou d'oignon (ou recueillez des cellules de la joue), ajoutez du détergent et du sel, filtrez, ajoutez une protéase comme du jus d'ananas frais, puis versez une couche d'éthanol glacé et enroulez l'ADN blanc à l'interface. Sautez ou modifiez n'importe quelle étape et voyez la masse enroulée, l'aspect et la pureté changer, avec l'explication du rôle de chaque étape. Un tableau de résultats et un diagramme en barres comparent les essais ; des tâches intégrées demandent un bon rendement propre, un essai témoin et le rôle de chaque étape.

Leçon : Extraire l'ADN d'un tissu végétal

Ce qu’elle montre

On peut extraire l'ADN d'un fruit avec des produits de cuisine. Écraser casse les parois cellulaires, le détergent dissout les membranes lipidiques de la cellule et du noyau, et le sel neutralise la charge négative de l'ADN pour que les brins s'agrègent. Une protéase, comme la broméline du jus d'ananas frais, retire les protéines liées à l'ADN. L'ADN ne se dissout pas dans l'éthanol : l'éthanol glacé versé sur le filtrat le fait apparaître en filaments blancs qu'on enroule sur une baguette. Les rendements viennent d'un modèle qualitatif ; le précipité réel contient aussi de l'ARN, des polysaccharides et de l'eau.

Mode d’emploi

Choisissez un Échantillon et réglez chaque étape : Broyage, Détergent pour 100 mL, Sel pour 100 mL, Protéase, Filtrer le mélange, Éthanol, Éthanol : filtrat et Verser l'éthanol. Cliquez sur Lancer pour voir toute la manipulation, ou sur Étape pour avancer pas à pas et lire pourquoi chaque étape compte. Chaque essai terminé ajoute une ligne au tableau et une barre au diagramme. Modifiez une seule étape à la fois pour faire un essai témoin, puis associez chaque étape à son rôle et cliquez sur Vérifier.

Paramètres modifiables

  • Échantillon Fraise, Banane, Oignon, Cellules de la joue
  • Broyage Aucun, Rapide, Soigneux
  • Détergent pour 100 mL 0–20 mL
  • Sel pour 100 mL 0–6 g
  • Protéase Aucune, Jus d'ananas frais, Jus d'ananas en conserve, Attendrisseur de viande
  • Filtrer le mélange
  • Éthanol Glacé, Température ambiante
  • Éthanol : filtrat 0,5–2 ×
  • Verser l'éthanol Doucement le long de la paroi, Vite

Questions à explorer

  1. Pourquoi n'obtient-on pas d'ADN sans détergent ?
  2. Pourquoi le jus d'ananas en conserve marche-t-il moins bien que le jus frais ?
  3. Pourquoi l'éthanol doit-il être glacé et versé doucement le long de la paroi du tube ?

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